日本乱中文字幕系列-日本伦理黄色大片在线观看网站-日本伦理片网站-日本伦理网站-韩国三级视频网站-韩国三级视频在线观看

當前位置:

首 頁 > 技術文章 > 三種比色方法
目錄導航 Directory

技術支持Article

三種比色方法
更新時間:2010-12-22 點擊次數:1707次

比色方法一般有BCA,Bradford,Lowry 等幾種方法。

Lowry 法:以zui早期的Biuret 反應為基礎,并有所改進。蛋白質與Cu2 反應,產生藍色的反應物。但是與Biuret 相比,Lowry 法敏感性更高。缺點是需要順序加入幾種不同的反應試劑;反應需要的時間較長;容易受到非蛋白物質的影響;含EDTATriton x-100ammonia sulfate 等物質的蛋白不適合此種方法。

BCABicinchoninine acid assay)法:這是一種較新的、更敏感的蛋白測試法。要分析的蛋白在堿性溶液里與Cu2 反應產生Cu ,后者與BCA形成螯合物,形成紫色化合物,吸收峰在562nm波長。此化合物與蛋白濃度的線性關系*,反應后形成的化合物非常穩定。相對于Lowry法,操作簡單,敏感度高。但是與Lowry法相似的是容易受到蛋白質之間以及去污劑的干擾。

Bradford 法:這種方法的原理是蛋白質與考馬斯亮蘭結合反應,產生的有色化合物吸收峰595nm。其zui大的特點是,敏感度好,是Lowry BCA 兩種測試方法的倍;操作更簡單,速度更快;只需要一種反應試劑;化合物可以穩定1小時,方便結果;而且與一系列干擾Lowry,BCA 反應的還原劑(如DTT,巰基乙醇)相容。但是對于去污劑依然是敏感的。zui主要的缺點是不同的標準品會導致同一樣品的結果差異較大,無可比性。